Der epidermale Wachstumsfaktor (EGF) wurde ursprünglich in Rohpräparaten des Nervenwachstumsfaktors, der aus den Unterkieferdrüsen von Mäusen hergestellt wurde, als eine Aktivität entdeckt, die ein frühes Öffnen der Augenlider, einen Durchbruch der Schneidezähne, eine Hemmung des Haarwachstums und eine Wachstumshemmung bei Injektion in neugeborene Mäuse induziert. Es ist prototypisch für eine Familie von Wachstumsfaktoren, die von membranverankerten Vorläufern abgeleitet sind. Alle Mitglieder dieser Familie sind durch die Anwesenheit von mindestens einer EGF-Struktureinheit (definiert durch die Anwesenheit eines konservierten 6-Cystein-Motivs, das drei Disulfidbindungen bildet) in ihrer extrazellulären Domäne gekennzeichnet. EGF wird anfänglich als ein 130 kDa Vorläufer-Transmembranprotein synthetisiert, das 9 EGF-Einheiten enthält. Die reife lösliche EGF-Sequenz entspricht der EGF-Einheit, die sich proximal der Transmembrandomäne befindet. Der Membran-EGF-Vorläufer ist in der Lage, an den EGF-Rezeptor zu binden, und es wurde berichtet, dass er biologisch aktiv ist. Reifer Ratten-EGF teilt 70 % aa-Sequenzidentität mit reifem menschlichem EGF.
Quelle
Escherichia coli.
Molekulargewicht
Ungefähr 6.1 kDa, eine einzelne nicht-glykosylierte Polypeptidkette mit 53 Aminosäuren, einschließlich 3 intramolekularer Disulfidbrücken.
Biologische Aktivität
Voll biologisch aktiv im Vergleich zum Standard. Die ED50, bestimmt durch einen Zellproliferationsassay mit murinen Balb/c 3T3-Zellen, beträgt weniger als 0.1 ng/ml, was einer spezifischen Aktivität von > 1.0 × 107 IE/mg entspricht.
Lyophilisiert aus einer 0.2 um filtrierten Lösung in PBS, pH 7.4.
Endotoxin
Weniger als 1 EU/ug rRtEGF, bestimmt nach der LAL-Methode.
Wiederherstellung
Wir empfehlen, dieses Fläschchen vor dem Öffnen kurz zu zentrifugieren, um den Inhalt auf den Boden zu bringen. In sterilem destilliertem Wasser oder wässrigem Puffer mit 0.1 % BSA auf eine Konzentration von 0.1-1.0 mg/ml rekonstituieren. Stammlösungen sollten in Arbeitsaliquote aufgeteilt und bei ≤ -20 °C gelagert werden. Weitere Verdünnungen sollten in geeigneten Pufferlösungen erfolgen.
Stabilität und Lagerung
Verwenden Sie einen manuellen Gefrierschrank und vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen.- 12 Monate ab Erhalt, -20 bis -70 °C wie geliefert.- 1 Monat, 2 bis 8 °C unter sterilen Bedingungen nach der Rekonstitution.- 3 Monate, -20 bis -70 °C unter sterilen Bedingungen nach Rekonstitution.
